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酸性蛋白酶活力的测定原理
作者：shzhjn 发表时间：2013/6/17 13:47:45 阅读：次
酸性蛋白酶活力的测定原理
福林试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色反应（钼蓝和钨蓝的混合物）。由于蛋白质分子中有含酚基的氨基酸（如酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等），它使蛋白质及其水解产物呈上述反应，利用这个原理可以测定蛋白酶活力的强弱。以酪蛋白为作用底物，在一定pH值和温度下，同酶液反应，经一段时间后加入三氯乙酸，终止酶的反应，并使残余的酪蛋白质沉淀，同水解产物分开。经过滤后取过滤液（含蛋白质水解产物的三氯乙酸溶液），用Na2C03碱化，再加入福林试剂使之发色。蓝色反应的强弱与过滤波中蛋白水解产物的量成正比例，而水解产物的量又同酶活力成正比。因此，根据蓝色反应的强弱可以计算出蛋白酶的活力。
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